固相萃取(SolidPhaseExtractionSPE)就是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附,達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。
固相萃取與液-液萃取相比固相萃取有很多優(yōu)點(diǎn):固相萃取不需要大量互不相溶的溶劑,處理過程中不會(huì)產(chǎn)生乳化現(xiàn)象,它采用高效﹑高選擇性的吸附劑(固定相),能顯著減少溶劑的用量,簡化樣品于處理過程,同時(shí)所需費(fèi)用也有所減少。一般說來固相萃取所需時(shí)間為液-液萃取的1/2,費(fèi)用為液-液萃取的1/5。其缺點(diǎn)是:目標(biāo)化合物的回收率和精密度要低于液-液萃取。
固相萃取的模式及原理:
固相萃取實(shí)質(zhì)上是一種液相色譜分離,其主要分離模式也與液相色譜相同,可分為正相(吸附劑極性大于洗脫液極性),反相(吸附劑極性小于洗脫液極性),離子交換和吸附。固相萃取所用的吸附劑也與液相色譜常用的固定相相同,只是在粒度上有所區(qū)別。
正相固相萃取所用的吸附劑都是極性的,用來萃取(保留)極性物質(zhì)。在正相萃取時(shí)目標(biāo)化合物如何保留在吸附劑上,取決于目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)與吸附劑表面的極性官能團(tuán)之間相互作用,其中包括了氫鍵,π—π鍵相互作用,偶極-偶極相互作用和偶極-誘導(dǎo)偶極相互作用以及其他的極性-極性作用。正相固相萃取可以從非極性溶劑樣品中吸附極性化合物。
反相固相萃取所用的吸附劑通常是非極性的或極性較弱的,所萃取的目標(biāo)化合物通常是中等極性到非極性化合物。目標(biāo)化合物與吸附劑間的作用是疏水性相互作用,主要是非極性-非極性相互作用,是范德華力或色散力。
離子交換固相萃取所用的吸附劑是帶有電荷的離子交換樹脂,所萃取的目標(biāo)化合物是帶有電荷的化合物,目標(biāo)化合物與吸附劑之間的相互作用是靜電吸引力。
固相萃取中吸附劑(固定相)的選擇主要是根據(jù)目標(biāo)化合物的性質(zhì)和樣品基體(即樣品的溶劑)性質(zhì)。目標(biāo)化合物的極性與吸附劑的極性非常相似的時(shí),可以得到目標(biāo)化合物的保留(吸附)。兩者極性越相似,保留越好(即吸附越好),所以要盡量選擇與目標(biāo)化合物極性相似的吸附劑。
例如:萃取碳?xì)浠衔?非極性)時(shí),要采用反相固相萃取(此時(shí)是非極性吸附劑)。當(dāng)目標(biāo)化合物極性適中時(shí),正﹑反相固相萃取都可使用。吸附劑的選擇還要受樣品的溶劑強(qiáng)度(即洗脫強(qiáng)度)的制約。
樣品溶劑的強(qiáng)度相對該吸附劑應(yīng)該是較弱的,弱溶劑會(huì)增強(qiáng)目標(biāo)化合物在吸附劑上的保留(吸附)。溶劑強(qiáng)度在正﹑反固相萃取中的順序是不同的。如果樣品溶劑的強(qiáng)度太強(qiáng),目標(biāo)化合物將得不到保留(吸附)或保留很弱。
例如:樣品溶劑是正己烷時(shí)用反相固相萃取就不合適了,因?yàn)檎和閷Ψ聪喙滔噍腿∈菑?qiáng)溶劑,目標(biāo)化合物將不會(huì)吸附在吸附劑上;當(dāng)樣品溶劑是水時(shí)就可以用反相固相萃取,因?yàn)樗畬Ψ聪喙滔噍腿∈侨跞軇?,不?huì)影響目標(biāo)化合物在吸附劑上的吸附。
固相萃取選擇分離模式和吸附劑時(shí)還要考慮以下幾點(diǎn):
1.目標(biāo)化合物在極性或非極性溶劑中的溶解度,這主要涉及淋洗液的選擇。
2.目標(biāo)化合物有無可能離子化(可用調(diào)節(jié)pH值實(shí)現(xiàn)離子化),從而決定是否采用離子交換固相萃取。
3.目標(biāo)化合物有無可能與吸附劑形成共價(jià)鍵,如形成共價(jià)鍵,在洗脫時(shí)可能會(huì)遇到麻煩。
4.非目標(biāo)化合物與目標(biāo)化合物在吸附劑上吸附點(diǎn)上的競爭程度,這關(guān)系到目標(biāo)化合物與干擾化合物是否能很好分離。